抗心肌肌凝蛋白重链的单链抗体V<sub>H</sub>和V<sub>L</sub>基因的合成

doi:10.13491/j.cnki.issn.1004-714x.2012.01.061

中国辐射卫生

2012, Vol. 21

Issue (1): 1-3 DOI: 10.13491/j.cnki.issn.1004-714x.2012.01.061

论著

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抗心肌肌凝蛋白重链的单链抗体V_H和V_L基因的合成

宋娜玲, 赵启仁, 张春明, 刘家慧, 刘洁, 褚丽萍, 王德芝, 贺欣, 王月英

中国医学科学院放射医学研究所, 天津分子核医学重点实验室, 天津 300192

Synthesiaed Genes of V_H and V_L of Single-Chain Antibody of Human Cardiac Myosin Heavy Chain

SONG Na-ling, ZHAO Qi-ren, ZHANG Chun-ming, LIU Jia-hui, LIU Jie, CHU Li-ping, WANG De-zhi, HE Xin, WANG Yue-ying

Tianjin Key laboratory of Molecular Nuclear Medicine, Institute of Radiation Medicine, Chinese Academy of Medical Sciences, Tianjin 300192 China

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摘要目的为研制心肌显像剂-抗人心肌肌凝蛋白重链(HCMHC)的单链抗体,合成抗HCMHC单链抗体的V_H和V_L基因。方法用TRI_ZOL试剂从抗HCMHC McAb杂交瘤细胞提取总RNA,合成第一链cDNA,以这第一链cDNA为模板,用合成的特异引物、DNA聚合酶和四种单核苷酸,对重链可变区(V_H)基因和轻链可变区(V_L)基因进行PCR扩增。对各步骤的产物进行鉴定,并做了对RNA的稳定性与贮存温度的关系,MgCl₂浓度和循环温度的最优化的选择。结果合成的第一链cDNA纯度达95%;扩增产物的琼脂糖凝胶电泳带呈单一明亮泳带,V_H和V_L基因分子量分别为340bp和320bp,与文献相一致。结论成功合成了V_H和V_L基因,为心肌显像及其显像剂抗HCMHC单链可变区抗体的研究打下了基础。

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关键词 ：心肌肌球蛋白重链, 可变区抗体, V_H基因, V_L基因

收稿日期: 2011-12-17

PACS:

R817.4

基金资助:国家自然科学基金项目(No.39970223),中国医学科学院放射医学研究所基金资助项目(No.SF1104)

通讯作者: 王月英,E-mail:Wyytj@yahoo.com.cn;贺欣,E-mail:saluoo@163.com E-mail: Wyytj@yahoo.com.cn;saluoo@163.com

作者简介: 宋娜玲(1970~),女,天津市人,硕士生导师,研究方向:分子核医学。

引用本文:

宋娜玲, 赵启仁, 张春明, 刘家慧, 刘洁, 褚丽萍, 王德芝, 贺欣, 王月英. 抗心肌肌凝蛋白重链的单链抗体V_H和V_L基因的合成[J]. 中国辐射卫生, 2012, 21(1): 1-3.
SONG Na-ling, ZHAO Qi-ren, ZHANG Chun-ming, LIU Jia-hui, LIU Jie, CHU Li-ping, WANG De-zhi, HE Xin, WANG Yue-ying. Synthesiaed Genes of V_H and V_L of Single-Chain Antibody of Human Cardiac Myosin Heavy Chain. , 2012, 21(1): 1-3.

链接本文:

http://www.zgfsws.com/CN/10.13491/j.cnki.issn.1004-714x.2012.01.061 或 http://www.zgfsws.com/CN/Y2012/V21/I1/1