集落形成法和Western Blot法研究ELAC2的辐射增敏作用
宁萍, 焦旸, 胡旭东, 朱巍, 徐加英, 樊赛军
苏州大学医学部放射医学与公共卫生学院, 江苏省放射医学与防护重点实验室, 江苏苏州 215123
Study the Radiosensitive Effect of ELAC2 by Using Colony Formation Assay and Western Blot Assay
NING Ping, JIAO Yang, HU Xu-dong, et al
School of Radiation Medicine and Public Health, Medical College of Soochow University, Jiangsu Provincial Key Laboratory of Radiation Medicine and Protection, Suzhou 215123 China
摘要 目的 研究ELAC2基因对乳腺癌细胞MCF-7辐射敏感性的影响。方法 利用脂质体转染法将ELAC2基因转入MCF-7细胞,同时设立未转染MCF-7和转染空载体的MCF-7/pcDNA3作为对照。RT-PCR法检测ELAC2基因的mRNA表达;集落形成法检测ELAC2基因对肿瘤细胞辐射敏感性的影响;Western Blot法检测ELAC2、FEN-1、MGMT、MRE11及Ku-70基因的蛋白表达水平。结果 ELAC2基因的mRNA和蛋白水平在转染细胞中表达明显增高。细胞接受0、0.5、1、2、4、6Gy的X射线照射后,ELAC2基因高表达使MCF-7细胞的剂量-效应曲线左移,细胞辐射敏感性增强。细胞经5Gy的X射线照射,ELAC2基因高表达未使MGMT蛋白和MRE11蛋白表达发生明显变化,而FEN-1蛋白及Ku-70蛋白表达水平显著下降。结论 ELAC2基因高表达使细胞辐射敏感性增高,其涉及的分子机制可能与ELAC2下调FEN-1蛋白及Ku-70蛋白表达水平有关。
关键词 ：
ELAC2 ,
乳腺癌 ,
辐射敏感性 ,
FEN-1 ,
Ku-70 ,
MGMT ,
MRE11
收稿日期: 2010-03-29
基金资助: 国家自然科学基金项目(30701001),苏州大学医学发展基金项目(EE126708)。
通讯作者:
樊赛军(1961~),男,教授。
作者简介 : 宁萍(1973~),女,四川眉山人,在读医学博士,主要从事肿瘤放射生物学研究。E-mail:ningping1973@gmail.com
引用本文:
宁萍, 焦旸, 胡旭东, 朱巍, 徐加英, 樊赛军. 集落形成法和Western Blot法研究ELAC2的辐射增敏作用[J]. 中国辐射卫生, 2010, 19(3): 269-271.
链接本文:
http://www.zgfsws.com/CN/10.13491/j.cnki.issn.1004-714x.2010.03.001 或 http://www.zgfsws.com/CN/Y2010/V19/I3/269
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